Данная методика славится своей точностью и универсальностью. Посредством ПЦР-обследования можно выявить одновременно несколько видов вредоносных микроорганизмов в одном образце. Для подобных мероприятий биоматериал может быть использован разнообразный: слюна, моча, кровь, плевральная жидкость и т.д.
С другой стороны, для осуществления данной диагностики необходимо современное оборудование и подготовленные должным образом кадры. При выборе медицинского учреждения лучше ориентироваться на крупные заведения, которые могут позволить себе приобрести новейшие приборы. Это прямым образом отобразится на скорости расшифровки анализа и на его точности.
[obvodka]Содержание статьи:
- Что представляет собой анализ методом ПЦР?
- Какие можно определить заболевания?
- Правила сбора материала для исследования
- Подготовка к сдаче
- Сроки проведения ПЦР-диагностики
- Показатели и расшифровка результатов ПЦР
- Точность ПЦР-диагностики
[/obvodka]
Что представляет собой анализ методом ПЦР?
Вся совокупность генетической информации, которой располагает любой живой организм, содержится в ДНК. Указанную нуклеиновую кислоту составляют четыре соединения. Идентифицировать живое создание совсем несложно: у каждого из них, независимо от параметров (будь то бактерия, животное, рыба), имеется своя уникальная ДНК.
Некоторые же микроорганизмы хранят генетические сведения о себе в РНК.
[obvodka]Фрагменты обоих нуклеиновых кислот (РНК и ДНК) можно выявить посредством полимеразной цепной реакции, которую также именуют ПЦР.[/obvodka]
В основе рассматриваемого тестирования – использование специальных ферментов, благодаря которым осуществляется копирование некоторых участков ДНК/РНК вирусных, микробных, иных инфекций.
Источником указанных возбудителей может служить практически любой биологический материал, взятый у человека: слюна кровь, моча, выделения из уретры или влагалища и т.д.
Так как в образцах крови и других биологических материалах содержание нуклеиновых кислот весьма низко, при помощи иных методов исследования выявить конкретное заболевания невозможно. В ходе ПЦР можно достичь увеличения уровня ДНК молекул, что обеспечивает достоверную постановку диагноза в будущем.
Для проведения анализа лаборанты применяют специальное оборудование – амплификатор. Данный прибор нагревает и охлаждает пробирки, в которые помещен биоматериал. Адекватный температурный режим прямо влияет на точность полученных результатов.
В итоге ПЦР лаборанты получают электрофореграмму, на которой зафиксированы фрагменты выделенных нуклеиновых кислот.
Указанное изображение сверяют с базой данных на компьютере — и таким образом определяют тип возбудителя, его концентрацию в организме.
Как выполняется и что может показать общий анализ крови — расшифровка результатов и нормы
Какие можно определить заболевания?
Посредством рассматриваемого анализа можно выявить следующие патологии:
1.Вирусные агенты, среди которых возбудители:
- ВИЧ.
- Гепатита А, В, С, D, G.
- Инфекционного мононуклеоза.
- Клещевого энцефалита.
- Герпеса I и II типа.
- Цитомегалии.
- Папилломавирусной инфекции.
2. Некоторые виды бактериальных инфекций:
- Туберкулез.
- Хеликобактер пилори.
- Гарднереллез
- Листериоз.
- Кампилобактериоз.
- Сифилис.
- Гонорея.
3. Внутриклеточные паразиты:
- Хламидии.
- Уреаплазмы.
- Микоплазмы.
4. Инфекции, спровоцированные грибками:
- Трихомониаз.
- Кандидоз.
[obvodka]На сегодняшний день к указанному тестированию весьма часто прибегают криминалисты, когда нужно установить, кому принадлежит биологический материал, взятый с места преступления.
При помощи полимеразной цепной реакции можно также установить отцовство.[/obvodka]
Правила сбора материала для исследования
Чтобы получить максимальной точный результат, забор биообразцов для ПЦР производят следующим образом:
- Инструментарий, контейнеры для изъятого материала должны быть продезинфицированы. А лучше использовать одноразовые приспособления.
- Собранные образцы крови нужно помещать в пробирки, которые содержат антикоагулянты. А в процессе забора обращаются к специальным вакуумным системам.
- Забор любого биоматериала нужно осуществлять в манипуляционном кабинете.
Для диагностики могут использовать различный материал: все будет зависеть от разновидности инфекции:
- Мaзки/сoскобы из шейки матки/уретры, утренняя мoча: при тестировании на патологии, которые передаются половым путем.
- Крoвь: при тестировaнии на TORCH-инфекции, ВИЧ, гепатит.
- Спиннoмозговая жидкoсть: при подозрении на дефекты в работе центральной нервной системе.
- Мазoк из горла/зева: при проверке на цитомегаловирус, мононуклеоз.
- Мoкрота/плевральная жидкость: при инфицировании легких.
- Образцы ткани плаценты: для исключения либо подтверждения внутриутробной инфекции.
Подготовка к сдаче
Пациенту перед сдачей биологических материалов необходимо должным образом подготовиться:
- Если указанный материал извлекают из уретры, запрещены половые акты и использование антибактериальных средств для интимной гигиены за 3 дня до сдачи анализа. За 3 часа до тестирования нужно воздержаться от мочеиспускания.
- Кровь для исследований берут ранним утром на голодный желудок.
- Для тестирования мочи используют первую ее порцию после сна. Для данного анализа пациенту следует предварительно приобрести специальный контейнер в аптеке. Взятый биоматериал желательно доставить в диагностическую лабораторию через два часа.
- Мазок из влагалища лучше брать за пару дней до менструации, либо через 1-2 дня после ее завершения.
- Образец слюны нужно изымать только после тщательного полоскания (3 раза) ротовой полости физиологическим раствором.
Если есть возможность, взятый биообразец нужно сразу же отнести в лабораторию.
При невозможности срочной доставки, материал можно хранить короткое время в прохладном месте (+4…+8 С).
При необходимости длительного хранения некоторые виды биоматериалов можно замораживать, но — только единожды.
К контейнеру следует обязательно приложить направление доктора на ПЦР.
Общий анализ мочи — расшифровка результатов и физические свойства мочи
Сроки проведения ПЦР-диагностики
Продолжительность подготовки результатов рассматриваемого вида тестирования будет определяться возможностями лаборатории, в которой его будут проводить.
[obvodka]Чаще всего на расшифровку уходит 1-2 дня. Однако, в экстренных ситуациях ПЦР может быть выполнен в течение нескольких часов.[/obvodka]
Показатели и расшифровка результатов ПЦР
В ходе применения качественной методики ПЦР-обследования, можно получить два варианта ответа:
- Положительный. Указывает на то, что в организме пациента присутствует чужеродные ДНК/РНК, а значит произошло заражение. Если у пациента нету каких-либо жалоб, в целом он чувствует себя хорошо, а результаты ПЦР-диагностики положительные, это свидетельствует о начальной стадии заболевания. При подобных ситуациях лечение не отнимет много времени и денег. В крайне редких случаях результат может быть ложноположительным: при нарушении правил антисептики в ходе забора биоматериала.
- Отрицательный. Означает отсутствие искомых вирусных агентов во взятом образце. Ложноотрицательный результат может стать следствием человеческого фактора (в первую очередь – нарушение правил хранения биообразца, неправильный его сбор).
Количественная оценка исследуемого биоматериала дает возможность делать выводы о том, какой уровень нагрузки оказывают вирусы/бактерии на организм.
В ходе расшифровки определяют число чужеродных РНК или ДНК, которые концентрируются в 1 мл. крови (МЕ/мл).
[obvodka]Благодаря подобной методике, доктор имеет возможность распознать стадию и форму болезни, назначить адекватное лечение, определиться с его продолжительностью. [/obvodka]
Повторный анализ зачастую назначают через 1 месяц после лечебных мероприятий.
Точность ПЦР-диагностики
Главными преимуществами рассматриваемого тестирования являются его надежность и достоверность.
[plus title=’Расшифровка ПЦР-диагностики дает возможность:’]
- Наиболее точно определить наличие/отсутствие инфекции в организме.
- Диагностировать разновидность вирусного агента.
- Отыскать бактерии даже при минимальном количестве вражеских ДНК во взятом биоматериале.[/plus]
Процент неверного диагностирования минимален.
Причины ложноположительных и ложноотрицательных результатов описаны выше.
